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一份核酸检测报告是怎样诞生的?看完后我都不好意思催结果了
  • 2022-11-23 10:05
  • 作者:佚名
  • 来源:天津市疾病预防控制中心、新华社天津分社、新华社新媒体中心、深圳卫健委微信公众号

很多人以为

核酸检测就像血常规一样

取标本

放仪器上检测

很快出结果

真正的核酸检测

没你想的那么简单!

Step 1  标本采集

这一步大家都懂,「捅嗓子眼儿」、「捅鼻子眼儿」。

采集后将拭子头浸入病毒保存液中保存,全城大筛查中通常是10个拭子一组进行保存。

Step 2  集合转运

 

在全城大筛查中,核酸采样地点通常是社区、学校等临时采样点,而检测点是有严格的生物安全和质量要求的实验室。因此,鼻、咽拭子在采样点集合后,被「全副武装」送往实验室。

Step 3  核收消毒

在严密保护下,标本被「护送」到检测实验室,由接收人员登记、核对。

全方位消毒,准备进入检测环节。

Step 4  全面防护

进入样本处理区域前,检测人员需做到100%的安全防护。

Step 5  信息录入

完成全面防护的工作人员进入样本处理区,将样本在生物安全柜内打开,取出样本消毒并录入信息系统。目前信息录入有两种,一种是条码录入,需要「滴」一声解决;另一种是手工填写的单子,需要挨个摘录到系统中。

Step 6  试剂配制

根据待检样本数量配置好核酸检测必备的试剂和辅助材料,精准配制和分装反应体系。为了提高效率,这一步和接下来的两步通常由不同的检测人员同时进行。

Step 7  核酸提取

①裂解

在进行核酸检测前,必须先用胍盐把花花绿绿的蛋白质「马甲」给脱了,才能将病毒的核酸释放出来,露出病毒的「真面目」。

②结合

加入磁珠与核酸结合。与各种细胞碎片、蛋白质说「拜拜」啦!

「我们的目标是?」「抓住核酸!」

③洗涤

结合一次就能抓到核酸了?哪有那么轻松哦!抓是抓到了,不过还是有少量的碎片、蛋白跟着核酸一起被黏上了。如何提高核酸的纯度?我们有两大法宝:加盐,加酸。

「吸附核酸-高盐低pH」、「洗脱核酸-低盐高pH」,反复两三次的吸附、洗脱,实现核酸的提取纯化。剩下的就是「赤裸裸」的核酸啦。

Step 8  核酸扩增

新冠病毒核酸检测常规筛查采用的是实时荧光PCR方法。PCR技术于1983年由美国著名化学家凯利·穆利斯(Kary Banks Mullis)发明,并获得1993年诺贝尔化学奖。PCR技术是通过模拟生物体体内DNA复制的方式,在体外选择性地将DNA某个特殊区域扩增出来的技术。

PCR反应就像一个大型装配车间。想要扩增某个病毒片段,首先根据它的特点设计一对引物。引物就是最有力的识别并定位的「抓手」,具有「指哪打哪」的精确性。在一群病毒核酸中,想抓新冠还是流感,抑或是鼻病毒、呼吸道合胞病毒等,只有你想不到,没有他抓不到。

当他识别到新冠病毒的「特点」——特异性的片段,马上一前一后「抓捕」,再添加dNTP、Mg2+、Taq酶等原材料,调节不同的温度,历经「变性-退火-延伸」三大步,完成病毒核酸组装。每扩增一次,DNA产量呈指数增长。新冠病毒扩增一般需要40个循环,理论上1个拷贝可以得到240=1,099,511,627,776个拷贝。即使样本中病毒含量很低,都可以通过PCR扩增检测出来。因此PCR反应有高特异性和高灵敏度的特点。

240个核酸片段拷贝,数量是很多,但无色无味又看不见,「敌在暗处」怎么办?那我们就让他在「明处」!实时荧光PCR反应就是在PCR反应基础上加入探针,每扩增出目标片段即会发出荧光,被荧光探测器捕获。

随着扩增次数的增加,荧光量累积,就是我们看到的曲线图了,我们就是通过它来判断有没有新冠病毒的。

「咦,医生,为啥阳性曲线图和阴性曲线图里面都有个阳性的曲线喃?是不是阴性被污染了哦?」

「莫慌,那个是人类管家基因,就是人类所有细胞都稳定表达的基因。」

「我是查新冠病毒,这个什么「管家」是来干啥呢?」

「这个是用来监测采样、运输以及检测过程的!」

「是不是管家基因阳性就代表采样部位没问题呢?」

「这可不一定,管家基因嘛,只能代表采到人体组织了,至于是否采到病毒潜伏部位,这可不一定。」

检测过程中不能停下来添加新标本,必须等待这一批扩增完成,才能进行下一批的扩增,这也是标本不能随到随检的原因之一。一个大型的实验室内,核酸扩增设备多达上百台,同时不间断工作的检测人员有数百人。

Step 9  检后处理

为防止可能出现的污染,相关样本在检测结束后密封放入指定专用医疗垃圾桶中,并进行高压灭菌处理。

Step 10  结果出炉

到这一步,检测人员还需查看结果、核对标本信息、上传数据,再由大数据平台进行处理和发布,大家就可以在网上查询到核酸检测结果了!

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标签:核酸检测报告  
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